膜片钳技术的基本记录模式
2022-10-22
膜片钳技术共有四种基本记录模式。
(1)细胞贴附记录模式(cell-attached recording);
当用微操纵器移动玻璃电极使其尖端轻压于细胞膜后,对电极施加一个负压力,可使细胞膜陷入玻璃电极端口,与电极内壁形成"Ω"形封接,电极内部和浴液之间的电阻可达1-100GΩ,此即为吉欧封接,使被吸附的膜片与浴液之间隔开。封接紧密,即使撤去电极内的负压力,封接仍能牢固维持,这就是细胞贴附记录模式。
(2)内面向外记录模式(inside-out recording);
先形成贴附式记录构型,在此基础上将电极提起,因高阻封接使电极尖端开口边缘与细胞膜的接触相当牢固,撕下一块膜片,在低钙溶液中,此膜片原来朝向细胞质的一侧朝向浴液,即可形成内面向外记录模式。
(3)外面向外记录模式(outside-out recording);
在形成全细胞记录构型基础上,将电极提起,玻璃电极尖端周围的膜片被扯断,附着于电极的细胞膜游离边缘相互融合,细胞膜原来的外侧仍朝向浴液,即外面向外记录模式。
(4)全细胞记录模式(whole-cell recording)。
在形成贴附式记录构型的基础上,进一步对玻璃电极内施加脉动式负压力,或(和)施加适当幅度、宽度的单脉冲点击,使玻璃电极尖端吸住的膜片破裂,电极内液和细胞内部连通,这就是全细胞记录模式。
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