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全细胞膜片钳技术

时间:2022-09-25     【原创】

      细胞是动物和人体的基本组成单元,细胞与细胞内的通信,是依靠其膜上的离子通道进行的,离子和离子通道是细胞兴奋产生生物电信号的基础,膜片钳技术是一种以记录通过离子通道的离子电流来反映细胞膜单一的(或多个的)离子通道分子活动的技术,该方法用玻璃微电极吸管把细胞膜通过负压吸引封接起来,由于电极尖端与细胞膜的高阻封接,封接区域内的细胞膜电流可流进玻璃吸管,以极为敏感的电流监视器(膜片钳放大器)测量此电流强度,就代表单一离子通道电流。


      膜片钳技术被称为研究离子通道的“金标准”,是研究离子通道的最重要的技术,不仅可以作为基础生物医学研究的工具,而且可以为临床医学研究服务。


      膜片钳技术可测量l00pA的电流灵敏度,为从分子水平了解生物膜离子通道的开启和关闭、动力学选择性和通透性等膜信息提供了直接的手段。为了解膜内第二信使的作用及过程,神经递质和***的分泌过程与作用,在微观水平,深入阐明药物与化学物的作用机理等提供了极为有用的研究手段。主要用于各种培养或分散的单个可兴奋细胞(神经细胞、干细胞、肌细胞、上皮细胞、免疫细胞等)及细胞转染离子通道的电流记录,同时可用于药物刺激前后可兴奋细胞细胞离子电流检测等。


      膜片钳记录系统仪器组成:德国HEKA的EPC-9/10型膜片钳放大器,采集软件为pulse8.0,微电极拉制仪用于拉制玻璃微电极,MP285三维操纵器用于推进玻璃微电极进行封接;IX71倒置荧光显微镜;静电屏蔽网;防震台;电脑等。

细胞要求:单个贴壁细胞,膜表面较光滑


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