膜片钳实验的灌流给药系统要求

一、灌流给药系统的构成

1、输入动力： 基本分两种，重力灌流和蠕动泵灌流。

2、管子： 这没什么好说的吧，尽可能少用转接，保证良好的密封性。

3、输出动力： 也分两种，用真空泵吸出，或者用蠕动泵吸出。

二、对灌流给药系统的几点要求：

1 传输要稳定：这是很重要的一个要求，传输忽快忽慢、甚至回吸（这个蠕动泵可能出现的问题），都会导致chamber里面液面的震动，都会导致你无法稳定地钳制细胞。

（1）重力灌流和蠕动泵都有各自的问题

       重力灌流时，随着管中液面的下降，压强是下降的（液压公式P=ρgh），会影响速度，我们一般会加一个输液管的调速器、或者Warner公司的flow valve（FR50或55）来稳定速度，这个我只试过，没正儿八经地用过，一切以实践为准。每隔一会儿就得注意补充溶液，挺麻烦的。

       蠕动泵么，速度倒是可以很稳定，但问题在于不是绝对连续，你观察一下它的传输结构就可以知道，溶液是靠棘轮一下一下挤出去的，只是速度快了、管子细了，你就看不出来了。

（2）出液口的气泡问题

       出液的速度是液面高度的决定因素。出液速度必须等于或略大于入液速度，所以，出液口肯定是会吸入气泡的，所吸入气泡的大小决定着液面的震动幅度。调节出液速度、出液口的位置时，比较依赖经验，新手一定要耐心。

2 噪音要小：

       这里说的噪音，包括声音和电磁噪声。力灌流的最大优点就是这两种噪音都没有。

3 传输距离要短：

       溶液距离chamber尽可能近一些，主要有两个优点：鲜的溶液可以尽快到达组织；灌流给药系统加药的时候等待的时间短，节省时间的同时，也可以避免夜长梦多（时间拖得越久，出意外的概率就越大，例如细胞状态变差、电极抖了、细胞掉了、破膜又封上了……）；这个近意味着，除了溶液的位置要离chamber近，传输的管子长度也应该尽可能地缩短，所选用的管子内径也尽量小一些，有利于溶液的快速到达。