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详细内容

膜片钳灌流系统实验

时间:2022-05-21     【原创】

膜片钳灌流系统的构成


1、输入动力: 基本分两种,重力灌流和蠕动泵灌流。


2、管子: 这没什么好说的吧,尽可能少用转接,保证良好的密封性。


3、输出动力: 也分两种,用真空泵吸出,或者用蠕动泵吸出。


二、对膜片钳灌流系统的几点要求


1 传输要稳定


       这是很重要的一个要求,传输忽快忽慢、甚至回吸(这个蠕动泵可能出现的问题),都会导致chamber里面液面的震动,都会导致你无法稳定地钳制细胞。


(1)重力灌流和蠕动泵都有各自的问题


       重力灌流时,随着管中液面的下降,压强是下降的(液压公式P=ρgh),会影响速度,我们一般会加一个输液管的调速器、或者Warner公司的flow valve(FR50或55)来稳定速度,这个我只试过,没正儿八经地用过,一切以实践为准。每隔一会儿就得注意补充溶液,挺麻烦的。


       蠕动泵么,速度倒是可以很稳定,但问题在于不是绝对连续,你观察一下它的传输结构就可以知道,溶液是靠棘轮一下一下挤出去的,只是速度快了、管子细了,你就看不出来了。


(2)膜片钳灌流系统出液口的气泡问题


       出液的速度是液面高度的决定因素。出液速度必须等于或略大于入液速度,所以,出液口肯定是会吸入气泡的,所吸入气泡的大小决定着液面的震动幅度。调节出液速度、出液口的位置时,比较依赖经验,新手一定要耐心。


2 噪音要小


       这里说的噪音,包括声音和电磁噪声。重力灌流的最大优点就是这两种噪音都没有。我们以前用进口的WPI的蠕动泵,声音那叫一个大,它的外号叫“老板机”,意思是老板在隔壁可以通过听声音来判断你是否在干活(绝对是周扒皮的路数)。


3 传输距离要短


       溶液距离chamber尽可能近一些,主要有两个优点:


1.新鲜的溶液可以尽快到达组织;


2.膜片钳灌流系统加药的时候等待的时间短,节省时间的同时,也可以避免夜长梦多;

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