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膜片钳实验—溶液配置

时间:2021-12-15     【原创】

       本文首先介绍膜片钳吉欧封接实验过程中需要的一些溶液配置、细胞培养及制备、实验仪器及实验材料。

1试剂与溶液

Dispase II为Roche公司产品,胎牛血清、BSA为Gibco产品,其他试剂均为Sigma产品。

标准KRBB(Krebs Ringer Bicarbonate Buffer)生理溶液:

NaCl 136mM、KCl 4.70mM、KH2PO4 1.20mM、NaHCO3 5mM、CaCl2 2.5mM、MgSO4.7H2O 1.2mM、HEPES 10mM、BSA 1 mg/ml、Glucose 3mM、Peniclline 100u/mL PH=7.0 with NaOH。

标准细胞外液:

NaCl 150mM、KCl 2.8mM、MgCl2.6H2O 1mM、 HEPES 10mM、 Glucose 5mM、CaCl2.2H2O 2.5mM   pH=7.2  渗透压 310 mosm。 

电极内液:

CsGlu 125mM、HEPES 10mM、MgATP 2mM、Na2GTP 0.3mM、MgCl2.6H2O 1mM、EGTA 0.31mM   pH=7.2  with CsOH  渗透压 300 mosm。

DMEM培养液:

DMEM(Cat.No.31600-026) 10mg/ml、NaHCO3 2mg/ml、HEPES 10mM、Peniclline 100u/mL、Strep. 100μg/ml  PH=7.0 with NaOH。


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