膜片钳的使用方法

       1976年发明了可用于检测细胞电生理特性的膜片钳技术。经过四十年的发展，膜片钳技术不但在细胞电生理研究领域得到了广泛应用，而且在技术上也得到了显著提升，比如出现了全自动膜片钳系统和膜片钳与其他现代生物检测技术结合应用的设备。

       膜片钳技术是一种基于电工学和电化学原理的分析手段，可以通过检测细胞的电信号(电生理性质)来研究化学物质、电、机械力等刺激因素对细胞功能的影响，从而帮助揭示细胞在生命活动中的化学和生物学机制。膜片钳技术是在电压钳技术基础上发展起来的，电压钳是利用负反馈技术将膜电位在空间和时间上固定于某一测定值，以研究动作电位产生过程中膜的离子通透性与膜电位之间的依从关系。但电压钳只能研究一个细胞上众多通道的综合活动规律，而无法反映单个通道的活动特点，同时通过细胞内微电极引导记录的离子通道电流其背景噪声太大。

       膜片钳使用的基本方法是：把经过加热抛光的玻璃微电极在液压推进器的操纵下，与清洁处理过的细胞膜形成高阻抗封接，导致电极内膜片与电极外的膜在电学上和化学上隔离起来，由于电性能隔离与微电极的相对低电阻(1～5 MΩ)，只要对微电极施以电压就能对膜片进行钳制，从微电极引出的微小离子电流通过高分辨、低噪声、高保真的电流——电压转换放大器输送至电子计算机进行分析处理。

       膜片钳技术实现的关键是建立高阻抗封接，并能通过特定的记录仪器反映这些变化。因而，膜片钳实验室除了一般电生理实验所需的仪器外，还特需防震工作台、屏蔽罩、膜片钳放大器、三维液压操纵器、 倒置显微镜、数据采集卡、数据记录和分析系统等。